微生物所在链霉菌启动子元件和内参基因研究中获进展

来源：微生物研究所   发布者：张荐辕   日期：2015-11-12  

链霉菌是重要的抗生素产生菌，对链霉菌进行代谢工程和合成生物学改造需要大量不同强度的启动子元件。然而，前期链霉菌只有一个组成型启动子ermEp* 被广泛应用。中国科学院微生物研究所杨克迁课题组在2013年开发了活性明显高于ermEp* 的强启动子kasOp*（Appl. Environ. Microbiol. 2013;79(14):4484-92）。目前，kasOp* 已经被提供给多个国内、外的链霉菌研究组使用，同时也在该所张立新课题组和娄春波课题组的相关工作中得到应用（Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2015;112(39):12181-6）。 为了得到具有不同序列、不同强度特征系列组成型启动子，杨克迁课题组从天蓝色链霉菌不同培养条件下的时序转录组数据出发，经过一系列理性的分析遴选和实验验证，获得了166个不同强度的组成型启动子。这些启动子将为链霉菌合成生物学研究提供元件支撑。相关工作发表在Microb. Cell Fact.，李珊珊和王俊阳为并列第一作者，研究员杨克迁和助理研究员王为善为并列通讯作者。 另外，转录水平的相对定量分析是链霉菌基础和应用研究的必要环节。最近有若干文献报道看家sigma因子hrdB 基因的转录水平是生长依赖的，不是理想的内参基因。杨克迁课题组结合不同培养条件下的时序转录组数据和后续的同源分析、內源外源扰动分析、功能分析和转录丰度分析，得到若干内参基因；进一步通过对候选内参基因转录水平的实验和普适性验证，鉴定得到了5个有普适性和不同表达丰度特征的内参基因。这些内参基因能够满足链霉菌中不同转录强度目的基因的转录本相对定量分析；它们协同使用将会显著提高转录分析的数据质量。相关文章发表在Sci. Rep.，李珊珊和王为善为并列第一作者，杨克迁为通讯作者。 以上研究获得国家“973”计划项目和国家自然科学基金资助。

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